生物药物的分离纯化和提取方式课件.ppt
- 【下载声明】
1. 本站全部试题类文档,若标题没写含答案,则无答案;标题注明含答案的文档,主观题也可能无答案。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
2. 本站全部PPT文档均不含视频和音频,PPT中出现的音频或视频标识(或文字)仅表示流程,实际无音频或视频文件。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
3. 本页资料《生物药物的分离纯化和提取方式课件.ppt》由用户(ziliao2023)主动上传,其收益全归该用户。163文库仅提供信息存储空间,仅对该用户上传内容的表现方式做保护处理,对上传内容本身不做任何修改或编辑。 若此文所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知163文库(点击联系客服),我们立即给予删除!
4. 请根据预览情况,自愿下载本文。本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
5. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007及以上版本和PDF阅读器,压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 生物 药物 分离 纯化 提取 方式 课件
- 资源描述:
-
1、生物药物的分离纯化和提取方式生物药物的分离纯化和提取方式主要讲授内容 1.生物药物原料的选择、预处理与保存方法生物药物原料的选择、预处理与保存方法 2.生物药物的提取生物药物的提取 3.蛋白质类药物的分离纯化方法蛋白质类药物的分离纯化方法 4.核酸类药物的分离纯化方法核酸类药物的分离纯化方法 5.糖类药物的分离纯化方法糖类药物的分离纯化方法 6.脂类药物的分离纯化方法脂类药物的分离纯化方法 7.氨基酸类药物的分离纯化方法氨基酸类药物的分离纯化方法1.1 生物药物原料的选择生物药物原料的选择 生物药物生产原料的选择原则主要是:(1)有效成分含量高,原料新鲜有效成分含量高,原料新鲜;(2)原料来源
2、原料来源丰富,易得,原料产地较近丰富,易得,原料产地较近;(3)原料中杂原料中杂质含量少质含量少;(4)原料成本低等原料成本低等。但是,同时具备这4种有利因素的原料不多,生产研究者可酌情选择,但第一条是最重要的。原料的选择还要注意如下事项:植物原料原料的选择还要注意如下事项:植物原料要注意要注意植物生长的季节性植物生长的季节性,选择最佳采集,选择最佳采集时间;微生物原料要注意时间;微生物原料要注意微生物生长的对微生物生长的对数期长短数期长短;动物原料有的要注意动物的;动物原料有的要注意动物的类类别别、年龄年龄与与性别性别。也应注意原料的也应注意原料的采集地采集地和和批次批次。1.2 原料的预处
3、理与保存原料的预处理与保存 动物原料动物原料采集后要立即处理,去除结缔组采集后要立即处理,去除结缔组织、脂肪组织等,并迅速冷冻贮存;织、脂肪组织等,并迅速冷冻贮存;植物植物原料确定后原料确定后,要择时采集并就地除去没有,要择时采集并就地除去没有用的部分,将有用部分保鲜处理;用的部分,将有用部分保鲜处理;收集微收集微生物原料生物原料时时,要及时将菌体细胞与培养液,要及时将菌体细胞与培养液分开,进行保鲜处理。分开,进行保鲜处理。原料的保存方法主要有:原料的保存方法主要有:冷冻法冷冻法。该。该方法适用于所有生物原料。常用方法适用于所有生物原料。常用-40速速冻。冻。有机溶剂脱水法有机溶剂脱水法。常用
4、的有机溶。常用的有机溶剂是丙酮。该法适用于原料少而价值高、剂是丙酮。该法适用于原料少而价值高、有机溶剂对活性物质没有破坏作用的原有机溶剂对活性物质没有破坏作用的原料,如脑垂体等。料,如脑垂体等。防腐剂保鲜防腐剂保鲜。常用。常用乙醇、苯酚等。该法适用于液体原料,乙醇、苯酚等。该法适用于液体原料,如发酵液、提取液等。如发酵液、提取液等。2.生物药物的提取生物药物的提取 (1)生物组织与细胞的破碎生物组织与细胞的破碎 (2)生物组织细胞破碎后立即进行提取生物组织细胞破碎后立即进行提取生物组织与细胞的破碎生物组织与细胞的破碎 生物药物大部分存在于生物药物大部分存在于生物组织或细胞生物组织或细胞中,中,
5、要提高提取率,对生物组织与细胞的破碎要提高提取率,对生物组织与细胞的破碎过程是非常重要的过程是非常重要的。常用的破碎方法有5种:A.磨切法磨切法,该法属于机械破碎方法,使用该法属于机械破碎方法,使用的设备有组织捣碎机、胶体磨、匀浆器、的设备有组织捣碎机、胶体磨、匀浆器、匀质机、球磨机、乳钵等。匀质机、球磨机、乳钵等。B.压力法压力法,这类方法有加压与减压两种,这类方法有加压与减压两种,常用的常用的法兰西压釜法兰西压釜使用效果良好。使用效果良好。C.反复冻融法反复冻融法,该方法设备简便,活性保持好,但用时较长。D.超声波振荡破碎法超声波振荡破碎法,该方法破碎效果较好,但由于局部发热,对活性有损失
6、。E.自溶法或酶解法自溶法或酶解法,用得较少。生物组织活性物质的提取要在细胞破碎后生物组织活性物质的提取要在细胞破碎后立即进行。立即进行。提取过程中提取过程中(1)要根据活性物质的性质,选择提取要根据活性物质的性质,选择提取试剂。试剂。提取试剂主要有:水、缓冲溶液、提取试剂主要有:水、缓冲溶液、盐溶液、乙醇、其他有机溶剂盐溶液、乙醇、其他有机溶剂(如氯仿、丙如氯仿、丙酮等酮等)。(2)考虑提取溶剂的用量(料液比)及考虑提取溶剂的用量(料液比)及提取次数、提取时间。提取次数、提取时间。(3)注意提取的温度、注意提取的温度、pH、变性剂等、变性剂等因素。因素。这样才可以保证活性物质提取充这样才可以
7、保证活性物质提取充分而且不变性。分而且不变性。3.蛋白质类药物的分离纯化方法蛋白质类药物的分离纯化方法 蛋白质类药物主要包括蛋白质、多肽和酶蛋白质类药物主要包括蛋白质、多肽和酶类等药物。它们的分离纯化方法有:类等药物。它们的分离纯化方法有:(1)沉淀法沉淀法(2)按按分子大小分离分子大小分离的方法的方法(3)按按分子所带电荷分子所带电荷进行分离的方法进行分离的方法(4)亲和层析法亲和层析法(1)沉淀法沉淀法 蛋白质、酶的初步纯化往往用沉淀法。该蛋白质、酶的初步纯化往往用沉淀法。该法的原理是使蛋白质胶体颗粒破坏,从而法的原理是使蛋白质胶体颗粒破坏,从而沉淀蛋白质。常用的有沉淀蛋白质。常用的有盐析
8、法盐析法、有机溶剂有机溶剂沉淀法沉淀法、等电点沉淀法等电点沉淀法、与靶物质结合沉与靶物质结合沉淀法淀法(如抗体一抗原如抗体一抗原)等。等。(2)按分子大小分离的方法按分子大小分离的方法 这类方法有这类方法有超滤法超滤法和和透析法透析法(即膜分离方法即膜分离方法)、凝胶层析法凝胶层析法、超速离心法超速离心法等。其中膜分离等。其中膜分离法可用于生物大分子物质的浓缩、分级和法可用于生物大分子物质的浓缩、分级和脱盐。脱盐。(3)按分子所带电荷进行分离的方法按分子所带电荷进行分离的方法 氨基酸、多肽、蛋白质、酶均为两性电解氨基酸、多肽、蛋白质、酶均为两性电解质。它们具有等电点,在离开等电点的质。它们具有
9、等电点,在离开等电点的pH时便会带正或负电荷。例如某蛋白质等电时便会带正或负电荷。例如某蛋白质等电点为点为7.0,当溶液,当溶液pH为为4.0时,分子则带有时,分子则带有正电荷。由于具有该性质,利用带电性质正电荷。由于具有该性质,利用带电性质进行分离是极其有效的方法。进行分离是极其有效的方法。利用蛋白质带电性质行分离的方法有:利用蛋白质带电性质行分离的方法有:离子交换柱层析法离子交换柱层析法;电泳法电泳法;等电聚焦法等电聚焦法。(4)亲和层析法)亲和层析法 大部分生物活性物质都有其作用的靶物质,大部分生物活性物质都有其作用的靶物质,如如酶与底物酶与底物(或抑制剂或抑制剂)、抗原与抗体抗原与抗体
10、、激素激素与受体与受体等,它们之间有特异的亲合作用,等,它们之间有特异的亲合作用,利用该性质设计的特异层析分离技术称为利用该性质设计的特异层析分离技术称为亲和层析。亲和层析。亲和层析分离专一性强亲和层析分离专一性强,操作,操作简便,是当前应用很广泛的分离方法之一。简便,是当前应用很广泛的分离方法之一。亲和层析法主要包括:亲和层析法主要包括:疏水反应层析、金疏水反应层析、金属螯合层析、免疫亲和层析、共价亲和层属螯合层析、免疫亲和层析、共价亲和层析、固定化染料亲和层析、特殊基团亲和析、固定化染料亲和层析、特殊基团亲和层析等。层析等。亲和层析技术大量应用于蛋白质亲和层析技术大量应用于蛋白质分离和纯化
11、。分离和纯化。4.核酸类药物的分离纯化方法核酸类药物的分离纯化方法 核酸类药物生产方法主要有核酸类药物生产方法主要有提取法提取法和和发酵发酵法法。提取法提取法生产生产DNA和和RNA的主要技术是,先的主要技术是,先提取核酸和蛋白质复合物,再解离核酸与提取核酸和蛋白质复合物,再解离核酸与蛋白质,然后分离蛋白质,然后分离RNA与与DNA。发酵法发酵法主要用于生产单核苷酸。主要用于生产单核苷酸。5糖类药物的分离纯化方法糖类药物的分离纯化方法 由于各种糖类药物的性质和原料来源不同,由于各种糖类药物的性质和原料来源不同,没有统一规范的提取和纯化工艺。这里只没有统一规范的提取和纯化工艺。这里只介绍介绍多糖
12、多糖和和粘多糖粘多糖的一般分离纯化方法。的一般分离纯化方法。提取方法提取方法 非降解法非降解法:适用于从含一种粘多糖的动物:适用于从含一种粘多糖的动物组织中提取粘多糖,提取采用的溶剂是组织中提取粘多糖,提取采用的溶剂是水水或或盐盐溶液。溶液。降解法:降解法:适用于从组织中提取结合比较牢适用于从组织中提取结合比较牢固的粘多糖。例如从软骨中分离提取硫酸固的粘多糖。例如从软骨中分离提取硫酸软骨素,就是用碱处理进行降解,又如用软骨素,就是用碱处理进行降解,又如用酶处理法可提取与蛋白质结合的多糖。酶处理法可提取与蛋白质结合的多糖。(2)分离方法分离方法 常用的分离纯化多糖的方法是常用的分离纯化多糖的方法
13、是乙醇沉淀法乙醇沉淀法和和离子交换层析法离子交换层析法。乙醇沉淀法乙醇沉淀法是从提取液中沉淀多糖的最简易是从提取液中沉淀多糖的最简易方法,也适用于方法,也适用于分级分离分级分离。用。用45倍体积的倍体积的乙醇可以使任何结缔组织中的粘多糖完全沉乙醇可以使任何结缔组织中的粘多糖完全沉淀。淀。季铵化合物季铵化合物也可用于沉淀粘多糖也可用于沉淀粘多糖,其原理是其原理是粘多糖的聚阴离子粘多糖的聚阴离子能与某些阳离子表面活性能与某些阳离子表面活性剂结合成不溶于水的盐,如十六烷基三甲基剂结合成不溶于水的盐,如十六烷基三甲基铵铵(CTA)等。等。离子交换层析法:离子交换层析法:粘多糖的聚阴离子能够粘多糖的聚阴
展开阅读全文